Die Verarbeitung und tiefgefrorene Lagerung archivierter Proben für jede Blutspende ist für Blutspendedienste in Deutschland verpflichtend. Die Proben müssen für ein weiteres Jahr über die Haltbarkeit der aus den Blutspenden gewonnenen Blutprodukte hinaus aufbewahrt werden. Diese archivierten Proben müssen für alle analytischen Tests geeignet sein, die im Rahmen von Rückblickverfahren angewendet werden. Zusätzlich empfiehlt das Nationale Beratungsgremium „Blut“ (Arbeitskreis Blut) in seiner Stellungnahme 47, dass Blutspendeeinrichtungen mindestens 1,5 ml Reservevolumen bei < –30°C archivieren sollten. Die Proben sollten so gelagert werden, dass sie mit Nucleinsäure-Amplifikationstechniken (NAT) weiter untersucht werden können. Besonders wichtig ist die eindeutige Identifizierung jeder Probe anhand ihres individuellen Behälters.

Diese Anforderungen können durch neue Prozesse unter Verwendung von LVL-Produkten erfüllt werden. Im Folgenden wird der Prozess anhand des praktischen Berichts des Zentralen Labors des Blutspendedienstes West in Hagen exemplarisch beschrieben.

Der Übergang fand im Jahr 2022 im Zentralen Labor des Blutspendedienstes West statt. Der gesamte Prozess der Erstellung, Verwaltung und Verarbeitung von Archivproben jeder Blutspende (ca. 750.000 pro Jahr) wurde an die nationalen Richtlinien des Nationalen Beratungsgremiums „Blut“ (Arbeitskreis Blut) angepasst. Die langfristige Sicherheit der Proben wurde verbessert, und der Prozess ist nun sowohl bei der Lagerung als auch bei der Entnahme deutlich weniger zeitaufwendig.

• Zentrifugation und automatisches Öffnen (Decapping) eines 10-ml-EDTA-Plasmaröhrchens
• Herstellung von 2 Aliquots à 1 ml EDTA-Plasma in LVL SAFE® 96 IT: 2D-Röhrchen mit Innengewinde im 96er-SBS-Format (Society for Biomolecular Sciences), unter Überwachung der korrekten Aspiration und Flüssigkeitsabgabe auf einer Liquid-Handling-Plattform bzw. in einem Pooling-System
• Verschließen der 2D-Röhrchen mit einem SAFE® Cap Sealer und SAFE® Push Cap Mats
• Verknüpfung der 2D-Codes der verarbeiteten Röhrchen im Rack mit dem Barcode des Röhrchenracks und des Lagertrays mittels des benutzerfreundlichen Tube Rack Readers LVL SAFE® READ Single Express
• Export der Daten über eine Schnittstelle in eine unternehmensinterne Datenbank
• Transport der beladenen Lagertrays in eine Gefrierzelle (–40 °C)
• Lagerung der EDTA-Plasma-Aliquots in mobilen Stapelracks für 5 Jahre

• Datenbankabfrage durch Eingabe der Spenden-ID, d. h. Ermittlung der Koordinaten zur Entnahme des archivierten Proben-Aliquots
• Schnelle Identifikation der Probe vor Ort mittels SAFE® READ Single Code HD in Kombination mit dem Tube Presenter 96
• Einfache und schnelle Entnahme einzelner Proben aus dem Lagersystem
• Verwendung in der Analytik ohne Zusammenführung einzelner Aliquots

Zur Sicherstellung einer durchgängigen Look-back-Analytik erfolgt während der erforderlichen Übergangsphase von 4 Jahren eine parallele Lagerung im Vorgängersystem.

• Look-back-Proben können mit individuellen Spende-NAT (Nucleic Acid Amplification Techniques) analysiert werden. Einzelne Röhrchen sind eindeutig identifizierbar.
• Die Übertragung und Lagerung von Look-back-Proben erfolgt in einzelnen Röhrchen mit 2D-Codierung, die eine doppelte ID aufweisen. Die Röhrchen sind mit einer Batch-ID vorcodiert, und jedes einzelne Sample hat zusätzlich eine eindeutige und unverwechselbare Kennzeichnung. Diese Methode gewährleistet eine klare und eindeutige Identifizierung, selbst bei gleichzeitiger Entnahme mehrerer Proben oder bei versehentlichen Betriebsfehlern (z. B. wenn ein Rack herunterfällt).
  VORHER: 1:1 Kennzeichnung der Probe nur über den Barcode der gesamten Mikrotiterplatte (MTP) und Zuordnung über das Datenmanagement.
• Das Volumen, das für jede Look-back-Probe pro Spende erforderlich ist, wurde auf mindestens 1,5 ml erhöht, aufgeteilt in 2 Aliquots für jede Blutkomponenten-Spende.
• Trennung von 2 x 1 ml pro Spende.
  VORHER: Trennung von 5 x 0,2 ml pro Spende.
• Deutlich weniger Zeitaufwand sowohl für den Archivierungsprozess als auch für das Abrufen archivierter Proben.
• Das Zusammenführen der einzelnen Aliquots ist für die Nachbearbeitung nicht erforderlich.
• Eine erneute Untersuchung wird mit dem verfügbaren Volumen von 1 ml sichergestellt; für jede PCR-Analyse sind mindestens 0,8 ml erforderlich.
• Das Abrufen und Entnehmen sowohl der Racks als auch der einzelnen Proben ist aufgrund des einfachen Zugriffs auf die Racks in den Lagersystemen deutlich schneller. Der Deckel des LVL-Racks verhindert, dass die Röhrchen aneinander reiben – sie lassen sich dadurch wesentlich besser ablesen.
• Dies reduziert die insgesamt benötigte Zeit für den Prozess erheblich, insbesondere für das Personal im Tiefkühllager (Gesundheitsvorteile).
  VORHER: Mühseliges Abrufen der entsprechenden Mikrotiterplatte aus einer vollständig gestapelten, zusammenklappbaren Plastikbox, gefolgt von zeitaufwendigem Entleeren und erneuten Stapeln aller anderen Mikrotiterplatten in der Box.
• Keine manuelle Kodierung der Racks – die Racks von LVL sind bereits vorcodiert.
  VORHER: Jedes einzelne Rack musste manuell mit einem Papierbarcode beschriftet werden.

• Höhere Sicherheit bezüglich der Probenidentifikation und -zuordnung.
  Die Identifikation ist aufgrund der guten Lesbarkeit zuverlässiger. Die nicht relevanten Proben bleiben ungeöffnet.
  VORHER: Das Verschließen erfolgte manuell mit einer Klebefolie. Wenn eine Analyse erforderlich war, musste der Deckel von allen 96 Wells der MTP entfernt werden.
• Minimiertes Risiko des Verlusts von Ziel-Nukleinsäure für NAT aufgrund von Abbauprozessen und dem damit verbundenen falsch-negativen NAT-Ergebnis.
• Einzelne Röhrchen aus dem SBS-Rack können unter standardisierten Bedingungen wieder aufgetaut werden, was das Risiko der Zersetzung der Nukleinsäuren des Erregers verringert.
  VORHER: Gleichzeitiges und unnötiges Auftauen und erneutes Einfrieren aller Proben im 96-Well-Mikrotiterplatten-Rack war notwendig.
• Hohe Sicherheit hinsichtlich der langfristigen Erhaltung der Produktqualität aufgrund der Haltbarkeit von Racks und Probenröhrchen.
  LVL sorgt in außergewöhnlich hohem Maße dafür, dass keine Materialfehler und damit verbundene Probenverluste während der Verarbeitung und jahrelangen Lagerung auftreten können:
• Jedes Röhrchen wird einem Lecktest unterzogen.
• Zertifikate für die Kompatibilität mit Automationssystemen sind verfügbar.
• Die Maßgenauigkeit der Racks wird aufrechterhalten.
• Ermüdungsbeständige Materialien werden verwendet.
• Eine Datenbankabgleich wird durchgeführt, um Duplikate bei der Kodierung zu verhindern.
• Erhöhte Sicherheit im Falle eines Ausfalls der Gefrierzelle.
  Im Falle einer technischen Störung der Gefrierzelle/Archivbereich können die Proben einfach auf ein Backup-Gerät übertragen werden, wodurch das unbeabsichtigte Auftauen der Proben verhindert wird.
• Geringere Kapazitäten des teuren Gefriervolumens sind erforderlich.
  Die Racks werden in sehr kompakter Form aufbewahrt.
• Automatisierte Prozessschritte sind möglich – einschließlich der Erweiterung auf ein vollständig automatisiertes Lagersystem.
• Die Racks von LVL entsprechen den Standards bezüglich der Maße (SBS) und Kodierverfahren (ISO 15415), wodurch sie mit allen Automationssystemen kompatibel sind.

Der neu eingeführte Prozess zur Speicherung und Verwaltung archivierter Blutbankproben in geeigneten Behältern, wie zuvor beschrieben, entspricht den aktuellen nationalen Richtlinien, ist effizient, einfach zu handhaben, reduziert den Arbeitsaufwand erheblich und eröffnet Möglichkeiten für weitere Automatisierung.

Die Zusammenarbeit mit LVL war ausgezeichnet. Wir sind sehr zufrieden und freuen uns auf die potenzielle Erweiterung hin zu einem vollständig automatisierten Lagersystem.

Die Kommunikation, der Support und die Liefertreue von LVL gewährleisten einen optimalen Prozess.

Das Unternehmen verfügt über professionelle Expertise und ein tiefes Verständnis der Abläufe. Wir schätzen die direkte, faktenbasierte und lösungsorientierte Kommunikation mit dem Unternehmen seit vielen Jahren sowie die kontinuierliche Optimierung seiner Produkte und Prozesse.
Der Support ist äußerst zuverlässig. Bei auftretenden Fragen oder Problemen erfolgt eine schnelle Antwort und exzellenter Service. Die Liefertreue, als wesentliche Voraussetzung für die langfristige Nutzung eines solchen Systems, ist garantiert.

Dr. Katja Konietzko
DRK Blutspenden
Service West

Dr. Lutz Pichl
DRK Blutspenden
Service West

Tobias Haessner
LVL technologies GmbH & Co. KG
T +49 7951 95613-45
M +49 175 7283454